Adres siedziby:
ul. Sarego 2
31-047 Kraków
tel. 12 422 88 52
fax 12 422 80 65
Adres do korespondencji:
ul. Krakowska 1
32-083 Balice k. Krakowa
tel. (Centrala) 12 357 25 00
tel. (Sekretariat) 12 357 27 00
fax 12 285 67 33
Dzisiaj jest: piątek, 20 października 2017 10:38:40
Odwiedziło nas: 8357028 gości (dzisiaj: 724, wczoraj: 4060)
Prace badawcze w 2007 roku

Temat 3326.5

"Wpływ różnych metod sztucznej aktywacji rekonstruowanych oocytów świni na potencjał rozwojowy zarodków transgenicznych uzyskanych techniką klonowania"

Autorzy: M. Skrzyszowska, M. Samiec, R. Słomski, D. Lipiński, Z. Smorąg, M. Bryła, L. Kątska-Książkiewicz, B. Ryńska

Opis

Transgenizacja komórek fibroblastycznych metodą lipofekcji skutkowała integracją całej konstrukcji genowej z DNA genomowym, która była pozytywnie skorelowana z ekspresją transgenu reporterowego na poziomie syntezy białka eGFP. Natomiast analiza fibroblastów transgenizowanych metodą nukleofekcji wykazała, że wszystkie linie komórkowe były eGFP-pozytywne, ale tylko u jednej potwierdzona została integracja transgenu z genomowym DNA. Może to świadczyć o przejściowej, względnie episomalnej ekspresji lub niestabilnej integracji konstrukcji genowej z genomowym DNA komórek fibroblastycznych. Pseudofizjologiczna aktywacja transcytozolowa rekonstytuowanych oocytów świni skutkowała zarówno wyższym potencjałem rozwojowym in vitro, jak i wyższą jakością morfologiczną transgenicznych zarodków klonalnych niż jednoczesna fuzja/aktywacja fizyczna oraz sekwencyjna aktywacja fizykochemiczna. Przedimplantacyjny potencjał rozwojowy transgenicznych zarodków klonalnych świni uzyskanych z oocytów poddawanych jednoczesnej fuzji/aktywacji fizycznej był wyższy niż zarodków uzyskanych z oocytów poddawanych sekwencyjnej aktywacji fizykochemicznej. Kompetencje jąder komórkowych transgenicznych fibroblastów płodowych do pokierowania rozwojem in vitro transgenicznych zarodków klonalnych świni do stadium moruli/blastocysty były wyższe niż kompetencje jąder fibroblastów tkanki skórnej dorosłych osobników, niezależnie od zastosowanych metod sztucznej aktywacji zrekonstytuowanych oocytów. Przyżyciowa analiza fluorescencyjna blastocyst klonalnych w oparciu o emisję zielonej biochemiluminescencji wykazała blisko 100% indeks ekspresji transgenu eGFP w komórkach zarodkowych.

Powrót do wszystkich tematów

 
© 2008-2017 Instytut Zootechniki PIB (National Research Institute of Animal Production)
Koło Wędkarskie PZW w Oleśnicy pzw.wolesnicy.info - Strona Koła Wędkarskiego w Oleśnicy (świętokrzyskie)
Odpowiedz na wyzwania (konkursy), głosuj, wygrywaj nagrody

Ta strona używa cookies i podobnych technologii. Szczegóły znajdziesz w Polityce Prywatności.