Adres siedziby:
ul. Sarego 2
31-047 Kraków
tel. 12 422 88 52
fax 12 422 80 65
Adres do korespondencji:
ul. Krakowska 1
32-083 Balice k. Krakowa
tel. (Centrala) 12 357 25 00
tel. (Sekretariat) 12 357 27 00
fax 12 285 67 33
Dzisiaj jest: piątek, 17 listopada 2017 20:32:48
Odwiedziło nas: 8430165 gości (dzisiaj: 1541, wczoraj: 1569)
Prace badawcze w 2012 roku

Zadanie 02-1.00.1

"Rozwój metod klonowania somatycznego zwierząt gospodarskich"

Cel zadania

rozwój metod klonowania somatycznego kóz i świń

Opis

W ramach realizacji badań wyprowadzono linie klonalne fibroblastów pochodzących z krwi obwodowej kozy, a także z fragmentów tkanki skórnej ucha. Hodowane komórki pasażowano po całkowitym zasiedleniu powierzchni naczyńka hodowlanego i poddawano kriokonserwacji w ciekłym azocie. Przed zabiegiem klonowania (24 h), linie klonalne komórek somatycznych poddawano synchronizacji faz cyklu mitotycznego w stadium G0/G1 metodą deprywacji troficznej (głodzenia), a pożywkę hodowlaną uzupełniano dodatkiem inhibitora deacetylazy histonów (trichostatyną A). Biorcą egzogennego DNA genomowego były enukleowane oocyty, które dojrzałość jądrową (mejotyczną) i cytoplazmatyczną osiągnęły w warunkach hodowli pozaustrojowej. Do dojrzewania in vitro pozyskano 53 oocyty kozy, z których 37 (69,8%) oocytów w stadium metafazy II wyselekcjonowano do klonowania. Do hodowli in vitro przeznaczono 31/37 (83,8%) zrekonstruowanych oocytów. Uzyskano 24/37 (64,8%) dzielących się zarodków, w tym do stadium moruli rozwinęło się, odpowiednio, 18/37 (48,6%) zarodków, a stadium blastocysty osiągnęło 11/37 (29,7%) zarodków klonalnych.

Rozpoczęto badania nad wykorzystaniem nowych inhibitorów deacetylaz histonów do epigenetycznej transformacji komórek-dawców jąder, dojrzewających in vitro oocytów i zarodków klonalnych świń. Wyprowadzono linie klonalne fibroblastów pochodzących z bioptatów układu skórno-powłokowego płodów oraz dojrzałych płciowo osobników. Komórki fibroblastyczne, epigenetycznie modulowane przy użyciu niespecyficznych inhibitorów deacetylaz histonów (trichostatyna A; TSA oraz skryptaid), stanowiły źródło komórek-dawców jąder w procedurze klonowania. Źródłem komórek-biorców egzogennych jąder były dojrzałe in vitro oocyty świni. Efektywność dojrzewania mejotycznego oocytów wyniosła 96,9% (248 dojrzałych oocytów w stosunku do 256 hodowanych oocytów). Ogółem, uzyskano 16/56 (28,6%) oraz 24/58 (41,4%) zarodków klonalnych świni w stadium blastocysty, z oocytów rekonstruowanych z jąder fibroblastów płodowych modulowanych epigenetycznie przy użyciu TSA- i skryptaidu oraz 9/52 (17,3%) i 18/57 (31,6%) z oocytów rekonstruowanych z jąder modyfikowanych epigenetycznie fibroblastów tkanki skórnej dorosłych osobników.

Powrót do wszystkich tematów

 
© 2008-2017 Instytut Zootechniki PIB (National Research Institute of Animal Production)
Koło Wędkarskie PZW w Oleśnicy pzw.wolesnicy.info - Strona Koła Wędkarskiego w Oleśnicy (świętokrzyskie)
Odpowiedz na wyzwania (konkursy), głosuj, wygrywaj nagrody

Ta strona używa cookies i podobnych technologii. Szczegóły znajdziesz w Polityce Prywatności.